【实验研究】补肾安胎冲剂对复发性流产小鼠胎盘滋养细胞miR-187、VEGF、VEGF-R2表达的影响

摘 要Abstract

　　目的　观察补肾安胎冲剂对复发性流产（RSA）小鼠胎盘滋养细胞miR-187、血管内皮生长因子（VEGF）及其受体VEGF-R2表达的影响，探讨其相关作用机制。方法　将雌性CBA/J小鼠与雄性DBA/2小鼠合笼饲养建立RSA小鼠模型，雌性CBA/J小鼠与雄性BALB/c小鼠合笼饲养作为正常妊娠小鼠，分离并培养胎盘滋养细胞，将细胞分为正常对照组（正常妊娠小鼠胎盘滋养细胞+空白血清）、模型组（RSA小鼠胎盘滋养细胞+空白血清）、补肾安胎冲剂组（RSA小鼠胎盘滋养细胞+20%含药血清）、miR-187 inhibitor NC组（RSA小鼠胎盘滋养细胞转染空白miR-187 inhibitor+空白血清）、miR-187 inhibitor组（RSA小鼠胎盘滋养细胞转染miR-187 inhibitor+空白血清）、联合组（RSA小鼠胎盘滋养细胞转染miR-187 inhibitor+20%含药血清）。RT-qPCR检测miR-187、VEGF、VEGF-R2 mRNA表达，Western blot检测VEGF、VEGF-R2蛋白表达，双荧光素酶实验检测miR-187和VEGF靶向关系，采用Spearman法分析miR-187与VEGF、VEGF-R2 mRNA表达量的相关性。结果　与正常对照组比较，模型组细胞miR-187表达显著升高，VEGF、VEGF-R2 mRNA和蛋白表达显著降低（P<0.05）；与模型组比较，补肾安胎冲剂组细胞 miR-187 表达显著降低，VEGF、VEGF-R2mRNA和蛋白表达显著升高（P<0.05）；与miR-187 inhibitor NC组比较，miR-187 inhibitor组细胞miR-187表达显著降低，VEGF、VEGF-R2 mRNA 和蛋白表达显著升高（P<0.05）；与补肾安胎冲剂组及 miR-187inhibitor 组比较，联合组细胞 miR-187 表达显著降低，VEGF、VEGF-R2 mRNA 和蛋白表达显著升高（P<0.05）。双荧光素酶实验结果显示，miR-187能够与VEGF靶向结合。Spearman相关性分析显示，miR-187与VEGF、VEGF-R2 mRNA 表达呈负相关。结论　补肾安胎冲剂可通过下调 miR-187 活性，靶向上调VEGF、VEGF-R2表达，介导血管新生，促进母胎界面血管重构，从而对RSA发挥治疗作用。

　　关键词　复发性流产；补肾安胎冲剂；miR-187；血管内皮生长因子；胎盘滋养细胞

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